深圳细胞谷2024年度亮点工作盘点——核心产品篇

APUNK™（Allogeneic PB/UCB Natural Killer，同种异体外周血/脐血自然杀伤细胞）是由深圳细胞谷研发并推出的非改造同种异体NK细胞治疗产品系列。以细胞谷最新突破的NK细胞SDAP（Screening, Detection, Amplification, Purification）技术“APUNK”命名。

APUNK™细胞产品可在体外培养增殖超过10000倍，能满足输注临床所需的细胞数。制备的NK细胞纯度大于99%，T细胞＜0.1%，远高于美国FDA认定的同种异体移植标准（NK细胞＞90%，T细胞＜5%）

间充质干细胞源性外泌体（MSC-derived exosomes）是MSCs旁分泌作用的主要物质，也是目前研究和应用最广泛的外泌体之一。其包含与MSCs类似治疗性的生长因子及mRNA等生物活性物质，具有组织修复、免疫调节等疗效，同时又具备独特的优势，如：无自我复制能力，所以没有致瘤性；纳米级体积避免毛细血管截留，可以通过血脑屏障到达中枢神经系统损伤部位发挥生物学作用等。

NK细胞外泌体含有多种诱导靶细胞死亡的裂解颗粒（穿孔素、颗粒酶）、细胞因子（TNF-α、IL-10、IFN-γ）、趋化因子（CCL3、CCL4、CCL5）和生长因子（GM-CSF），可以直接或间接的发挥抗肿瘤效果而备受关注。深圳细胞谷制备的NK细胞外泌体已在体外证明呈剂量依赖性发挥抗肿瘤活性。除此之外，NK细胞外泌体在治疗糖尿病和皮肤病等多种疾病领域上也具有潜在的应用价值。
 

γδT细胞占T细胞群体的0.5%~5%，其TCR由γ链和δ链组成，主要存在于上皮和粘膜组织，比如皮肤、肠道等。γδT细胞和αβT细胞有共同之处，就是都可发挥细胞毒性效应（ADCC）功能、可产生促炎细胞因子。而最大区别在于，γδT细胞没有MHC的限制性，具备通用型细胞治疗产品的特质。γδT细胞可直接杀伤肿瘤细胞：迁移到肿瘤局部环境后，可通过穿孔素-颗粒酶途径溶解癌细胞；也可以通过配体TRAIL和FasL消灭癌细胞。γδT细胞也可间接杀伤肿瘤细胞：通过抗体依赖的细胞毒性作用（ADCC）靶向肿瘤细胞。γδT细胞是分泌细胞因子（IFN-γ和TNF-α等）重要的早期来源细胞。IFN-γ和TNF-α均通过多种机制抑制癌症的生长。γδT细胞还可分别通过与B细胞、DC细胞、αβT细胞和NK细胞相互作用而发挥其间接抗肿瘤作用。

间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell, MSCs)是具有自我更新能力和来源于中胚层的多能成体干细胞，可分化成多种细胞类型，如软骨细胞、脂肪细胞、成骨细胞和其他细胞类型，因此被用于许多类型的研究，已在多种疾病的多项临床试验研究(CTSs)中被证明是安全有效的。与其他干细胞相比，MSC在具有多项分化潜能的同时，几乎没有成瘤性和致瘤性，同时其还不存在伦理问题。
 

CAR-T细胞疗法也面临着一些挑战，包括严重的副作用，如细胞因子释放综合征（CRS）和神经毒性。与CAR-T细胞相比，CAR-NK细胞具有一些独特的优势，其中最重要的是拥有更高的安全性，并且更适合“现成”的疗法，提供现货型治疗产品。目前细胞谷提供多种靶点可选，涵盖血液瘤和实体瘤等常见靶点，并提供从NK细胞采集、转导到扩增的全流程服务，以CD19CAR为例，CAR-NK阳性率可达到50%以上，且NK纯度大于95%，T细胞和B细胞占比均小于1%，已达到国际同种异体移植标准，一个月内可扩增至1万倍，助力客户加速CAR-NK领域研究进程。

国际首创：BaEV包膜工程化稳转细胞株：实现世界领先的完全自主知识产权的BaEV包膜逆转录病毒包装工程细胞系的开发及工业化应用；市面上常应用的VSV-G慢病毒或GaLV逆转录病毒不足以解决NK细胞高效转导难题，而深圳细胞谷已经实现BaEV包膜的技术突破，利用BaEV-WT稳定产毒细胞系，可实现NK、T、GDT等原代细胞的高效转导，以CD19 CAR为例，转导原代细胞阳性率最高可达80~90%且维持稳定，不影响原代细胞的活率与增殖。

工程化类病毒颗粒（Engineered virus-like particles，eVLP），能够克服蛋白复合物递送的多个瓶颈，eVLP是无DNA的，直接递送基因编辑器的核糖核蛋白（RNP），且脱靶性最小；紧跟前沿热点，开发基于逆转录病毒的新型递送技术，开发敲除、敲入、定点敲除敲入等新型基因编辑技术，提高安全性，解决现有递送技术的弊端。目前已针对TRAC等靶点进行高效敲除，正在开发稳转eVLP系统，助力工业化大规模化生产；

用于人原代PBMC来源T细胞、NK细胞、GDT细胞及鼠原代T细胞、NK细胞的激活和扩增培养，仅为使用一站式服务客户定制和配套使用。