慢病毒载体
概述
慢病毒载体系统是一种能非常高效的把外源基因稳定整合到哺乳动物细胞中的载体工具。除了常规质粒转染外，目前该系统也是把外源基因转入哺乳动物细胞的最常用方法之一。由于具有目的基因和启动子选择的灵活性以及转染细胞类型的广泛性两大特点，使得慢病毒载体系统成为倍受欢迎的外源基因表达系统。
慢病毒载体来源于人类免疫缺陷病毒HIV，属于逆转录病毒家族。野生型慢病毒基因组是线性双正链RNA。
慢病毒重组载体构建完成后与辅助质粒一起转染进入包装细胞。在包装细胞中，位于两个长末端重复序列（LTR）之间的DNA片段会被转录成RNA，由辅助质粒表达的病毒蛋白将其包装形成病毒颗粒。包装后的活体病毒将会被释放到上清液中，可以直接收集或进一步浓缩病毒转染靶细胞。
当病毒转导靶细胞时，释放到宿主细胞中的病毒RNA借助逆转录酶逆转录成双链DNA，然后随机整合进宿主细胞的基因组中。在病毒载体中，位于两个LTR的DNA片段和病毒基因组都会稳定整合到靶细胞的基因组中。
关于慢病毒基因表达载体的更多信息，请参考以下文献。
| 参考文献 | 主题 |
|---|---|
| J Virol. 72:8463 (1998) | The 3rd generation lentivirus vectors |
| J Virol. 72:9873 (1998) | Self-inactivating lentivirus vectors |
| Science. 272:263 (1996) | Transduction of non-dividing cells by lentivirus vectors |
| Curr Gene Ther. 5:387 (2005) | Tropism of lentiviral vectors |
| J Virol. 77:4685 (2003) | Impact of cPPT to lentivirus vector transduction |
| J Virol. 73:2886 (1999) | WPRE enhances the expression of transgenes |
| Nat Protoc. 1:241 (2006) | Production and purification of lentiviral vectors |
