慢病毒载体是在HIV-1基础上改造而成的病毒载体系统,可将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。慢病毒已经成为表达外源基因或外源shRNA的常用载体形式之一,并且正在获得越来越广泛的应用。细胞谷可以提供针对多种肿瘤靶点,如BCMA、CD19、CD38、CD22、EGFR/EGFRVIII 等,进行慢病毒载体定制服务。
慢病毒载体(Lentivirus)是一类改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒载体,是逆转录病毒的一种,基因组是RNA,其毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代,属于假型病毒可将外源基因整合到基因组中实现稳定表达,具有感染分裂期与非分裂期细胞的特性。
慢病毒基因组进入细胞后,在细胞浆中反转录为DNA,形成DNA整合前复合体,进入细胞核后,DNA整合到细胞基因组中。整合后的DNA转录成mRNA,回到细胞浆中,表达目的蛋白或产生小RNA。慢病毒介导的基因表达或小RNA干扰作用持续且稳定,并随细胞基因组的分裂而分裂(图1)。
图1 慢病毒包装和侵染细胞的过程
慢病毒载体具有宿主范围广,免疫原性低,基因容量大,可以长期表达等特点。能够有效地感染培养的肿瘤细胞、肝细胞、心肌细胞、神经元、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞。
慢病毒的感染具有整合特性,能够将外源基因有效地整合到宿主染色体上,达到持久性表达,因而可构建稳定细胞株,用于基因的细胞功能研究。借助慢病毒载体改造T细胞可用于CAR-T细胞治疗。
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